Noul kit de detectare a acidului nucleic Coronavirus (SARS-Cov-2).

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Fluminereuscent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Noul kit de detectare a acidului nucleic coronavirus (SARS-Cov-2) (metoda cu sondă RT-PCR fluorescentă)

【Packaging specifications 】25 Teste/Kit

【Intended usvârstă】

Acest kit este utilizat pentru detectarea calitativă a acidului nucleic de la noul coronavirus în tampoane nazofaringiene, tampoane orofaringiene (gât), tampoane nazale anterioare, tampoane la mijlocul cornetului, spălări nazale și aspirate nazale de la persoane care sunt suspectate de COVID19 de către furnizorul lor de asistență medicală. Detectarea genelor ORF1ab și N ale noului coronavirus poate fi utilizată pentru diagnosticarea auxiliară și monitorizarea epidemiologică a noului coronavirus.

【Principles of the procedure 】

Acest kit este conceput pentru anumite sonde TaqMan și primeri specifici proiectați pentru noul coronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab și secvențele genei N. Soluția de reacție PCR conține 3 seturi de primeri specifici și sonde fluorescente pentru detectarea specifică a țintelor, iar un set suplimentar de primeri specifici și sonde fluorescente este utilizat ca control standard intern al trusei pentru detectarea genelor endogene de menaj.

Principiul testului este că sonda fluorescentă specifică este digerată și degradată de activitatea exonuclează a enzimei Taq în reacția PCR, astfel încât grupul fluorescent reporter și grupul fluorescent stins să fie separate, astfel încât sistemul de monitorizare a fluorescenței să poată primi un fluorescent. semnal, iar apoi Prin efectul de îmbogățire al amplificării PCR, semnalul de fluorescență al sondei atinge o valoare de prag stabilită-valoarea Ct (pragul ciclului). În cazul în care nu există amplicon țintă, grupul reporter al sondei este aproape de grupul de stingere. În acest moment, are loc transferul de energie de rezonanță fluorescentă, iar fluorescența grupului reporter este stinsă de grupul de stingere, astfel încât semnalul fluorescent nu poate fi detectat de instrumentul PCR fluorescent.

Pentru a monitoriza utilizarea reactivilor în timpul testului, trusa este echipată cu controale pozitive și negative: controlul pozitiv conține plasmida recombinantă a locului țintă, iar controlul negativ este apă distilată, care este utilizată pentru monitorizarea poluării mediului. Se recomandă setarea simultană a unui control pozitiv și a unui control negativ la testare.

【Main components 】

Nota：(1) Componentele din diferite kituri de lot nu pot fi amestecate sau schimbate.

(2) Pregătiți-vă propriul reactiv: Kit de extracție a acidului nucleic.

【Storage conditions şi expiration date 】

For BST-SARS-25:Transportați și depozitați la -20±5℃ pentru o lungă perioadă de timp.

For BST-SARS-DR-25:Transport la temperatura camerei. A se păstra la -20±5℃ pentru o lungă perioadă de timp.

Evitați ciclurile repetate de îngheț-dezgheț. Perioada de valabilitate este stabilită provizoriu pentru 12 luni.

Consultați eticheta pentru data de fabricație și utilizare.

După prima deschidere, reactivul poate fi păstrat la -20±5 °C timp de cel mult 1 lună sau până la sfârșitul perioadei de reactiv, indiferent de data care apare prima, pentru a evita ciclurile repetate de îngheț-dezgheț și numărul de înghețare a reactivului. -ciclurile de dezghețare nu trebuie să depășească de 6 ori.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1.Tipul de probă aplicabil: Soluție de acid nucleic extras.

2. Depozitarea și transportul probelor: Depozitați la -20±5℃ timp de 6 luni. Înghețați și dezghețați probele de cel mult 6 ori.

【TESTing method】

1.Nucleic acid extraction

Selectați un kit adecvat de extracție a acidului nucleic pentru a extrage acidul nucleic viral și urmați instrucțiunile trusei corespunzătoare. Se recomandă utilizarea unui kit de extracție și purificare a acidului nucleic produs de Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. sau un kit echivalent de purificare a acidului nucleic.

2.  Reaction reagent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Îndepărtați amestecul SARS-Cov-2 și amestecul de enzime, topiți complet la temperatura camerei amestecați bine cu dispozitivul Vortex și apoi centrifugeți pentru scurt timp.

(2) Amestecul de enzime de 16,5 uL a fost adăugat la 358,5 uL de amestec SARS-Cov-2 și amestecat bine pentru a obține soluția de reacție mixtă.

(3) Pregătiți un tub octal PCR curat de 0,2 ml și marcați-l cu 15 uL din soluția de reacție mixtă de mai sus per godeu.

(4) Adăugați 15 μL de soluție purificată de acid nucleic, controlul pozitiv și controlul negativ și acoperiți cu grijă capacul tubului octal.

(5) Amestecați bine răsturnând cu susul în jos și centrifugeți rapid pentru a concentra lichidul pe fundul tubului.

1